内蒙古WB背景高的原因有哪些

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WB背景高的原因有哪些

原因	解决办法
抗体浓度太高	优化/降低内蒙古一抗和二抗的浓度
抗体孵育温度过高	4℃孵育
二抗非特异性结合或与封闭剂交叉反应	设置二抗对照(不加一抗),降低二抗浓度
一抗或二抗与封闭剂有交叉反应	在孵育和洗涤液中加入Tween-20减少交叉反应.
封闭不充分	延长封闭时间，更换合适的封闭剂（脱脂奶粉，BSA，酪蛋白等）
抗体与其它蛋白质交叉反应	更换不同的封闭液；勿在含生物素体系中使用脱脂奶粉封闭；降低二抗浓度；检测二抗与膜的交叉反应性
洗膜不充分	增加洗涤次数
膜干燥	保证充分的反应液，避免出现干膜现象

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